毒理研究NMT标准化方案
一、视频资源
二、参考文献
三、常测哪些指标
NH4+、H+、Ca2+、K+、Na+、Cl-
四、检测这些离子流、分子流，有什么生物学意义
-
2）科研案例
利用斑马鱼侧线毛细胞作为模式细胞，评价新霉素的耳毒性。前期研究发现，利用非损伤微测技术传感器机械刺激毛细胞时，会激活毛细胞上的钙通道，导致毛细胞吸收Ca2+，并且为非损伤微测技术所观测。新霉素处理后，Ca2+吸收的过程被抑制，且Ca2+吸收速率的下降程度与新霉素浓度成正比。进一步研究发现，提升毛细胞外环境的Ca2+，可以有效地缓解新霉素处理后毛细胞Ca2+吸收的下降幅度，预示提升外环境Ca2+浓度是缓解新霉素耳毒性的潜在方法。在这个研究中，Ca2+内流（吸收）是毛细胞的生理功能的“指示剂”。
-
1）H+生理功能概述
2）科研案例
利用斑马鱼皮肤离子细胞作为模式细胞，评价化疗药物顺铂的肾毒性。幼体斑马鱼的皮肤离子细胞起到调节体内酸碱平衡、渗透平衡等重要作用，正常情况下可测到皮肤H+的外排（排酸），顺铂处理后，皮肤H+外排速率下降，且下降幅度与顺铂的处理剂量成正比。通过荧光染色发现，此时皮肤离子细胞的数量明显减少。这预示着可以通过检测皮肤H+外排的速率，来筛选用于缓解化疗药物肾毒性的药物。
五、可以检测哪些样品
1、动物样品
1）细胞
神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等
2）组织器官
肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑（海马体等）、胚胎（大鼠、鱼）、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏（香螺）、卵（鱼、鸡蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉组织（肌纤维、心肌）
3）其它动物样品
珊瑚、螨虫、昆虫（果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽）、蝌蚪、水蛭、蓝蟹（微感毛）、变形虫、水丝蚓
2、植物样品
1）营养器官
茎：边材、心材、微管形成层、木质部
2）生殖器官
花：花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子：整体、胚
果实：果壳、果皮、果肉（苹果、柑橘）、籽粒、棉花纤维、棉桃
3）细胞：植物悬浮细胞、液泡
4）愈伤组织
3、微生物样品
酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌（大肠杆菌）
4、其它生物样品
周丛生物
5、非生物样品
金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料
六、样品需要做哪些前处理
国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测，因此动植物材料在检测前，不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。
1、动物单细胞
因NMT是活体检测，故从培养箱中拿出来后，置于培养皿中，直接检测即可。
2、动物组织
因NMT是活体检测，无需提前处理。如检测部位天然暴露在外，如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞，直接检测即可。如检测部位位于体内，需在检测时暴露出检测部位（可采用麻醉的方式），后检测即可。
3、植物根茎叶等组织器官
天然暴露在外的组织器官，例如根、茎、叶的表面，无需任何处理，直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。
4、植物原生质体/液泡
因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测，检测时不接触样品，故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中，提取出来后检测。
5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
无需提前处理。因这些细胞处于组织内部，故检测时采用撕取等方式，暴露出相应细胞即可。
6、植物花粉管
离体萌发：在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测；在体萌发：将柱头置于培养皿中，待萌发一段时间后即可直接检测。
7、植物果实
无需提前处理。如待测部位位于果实内部，需在检测前暴露出相应部位即可。
8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时，置于培养皿中检测即可。
七、有哪些检测方式？
即瞬时处理，是指在检测过程中，在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的处理方法，目的是为了观察瞬间干旱胁迫下，样品短时间内的离子/分子的变化趋势，即短时效应。
2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后（数十分钟/数小时/数天），观察植物离子/分子进出的情况，即长时效应。
八、检测环境是空气还是溶液
检测时，只要求待测部位浸于溶液中（无需整体都浸在溶液里）。
九、样品是如何检测的
十、可以送样检测吗
可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理，由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心，提供检测服务。点击获取测试服务
