极性生长研究NMT标准化方案
极性生长研究NMT标准化方案
一、视频资源
二、参考文献
F2018-001，Science，花粉管，Ca2+
CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis
C2014-010，孙蒙祥，武汉大学，J EXP BOT，花粉管，Ca2+
Exogenous γ-aminobutyric acid affects pollen tube growth via modulating putative Ca2+-permeable membrane channels and is coupled to negative regulation on glutamate decarboxylase
C2014-006，宋纯鹏，河南大学，Plant Cell，根毛/液泡，NH4+/Ca2+
A Receptor-Like Kinase Mediates Ammonium Homeostasis and Is Important for the Polar Growth of Root Hairs in Arabidopsis
C2014-004，涂礼莉，华中农业大学，PLANT BIOTECHNOL J，纤维细胞，K+
A peptide hormone gene, GhPSK promotes fibre elongation and contributes to longer and finer cotton fibre
C2014-003，张献龙/涂礼莉，华中农业大学，New Phytologist，纤维细胞，Ca2+
The calcium sensor GhCaM7 promotes cotton fiber elongation by modulating reactive oxygen species (ROS) production
C2012-013，林金星，中科院植物研究所，Plant Cell，根，IAA
F2011-020，J EXP BOT，花粉管，Cl-
The essential role of anionic transport in plant cells: the pollen tube as a case study
F2011-009，Science，花粉管，Ca2+
Glutamate Receptor–Like Genes Form Ca2+ Channels in Pollen Tubes and Are Regulated by Pistil D-Serine
C2009-007，林金星，中科院植物研究所，Plant Physiology，花粉管，Ca2+
Combined proteomic and cytological analysis of Ca2+-calmodulin regulation in Picea meyeri pollen tube growth
C2009-002，林金星，中科院植物研究所，New Phytologist，花粉管，Ca2+
Nitric oxide modulates the influx of extracellular Ca2+ and actin filament organization during cell wall construction in Pinus bungeana pollen tubes
三、常测哪些指标
Ca2+、H+
四、检测这些离子流、分子流，有什么生物学意义
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2）科研案例
检测野生型（Col-0）和不同种类突变体的拟南芥花粉管尖端Ca2+吸收速率，结果显示，花粉管表达单突变体拟南芥GLR（AtGLRs）表现出生长、花粉管质膜Ca2+通道显示的Ca2+流速；但是，高阶突变体AtGLR3.3表现出与假设相反的现象。结合其他数据结果共同揭示了一种机制，即 AtCNIHs 引发 AtGLRs 的排布和活性变化，从而调控Ca2+稳态。（Wudick MM, Portes MT, Michard E, et al. CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis. Science. 2018;360(6388):533-536. doi:10.1126/science.aar6464）
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1）H+生理功能概述
2）科研案例
使用双探针同时测试系统同时测量百合花粉管的H+和O2通量，结果表明，H+外排而氧O2内流，并且它们在本构碱性带区域周围彼此紧密相关。特别是，当H+外排量增加时，O2流入量也增加。因此，Hepler小组提出的花粉管碱化区存在浓缩活性线粒体的假说得到了支持。
五、可以检测哪些样品
1、动物样品
1）细胞
神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等
2）组织器官
肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑（海马体等）、胚胎（大鼠、鱼）、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏（香螺）、卵（鱼、鸡蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉组织（肌纤维、心肌）
3）其它动物样品
珊瑚、螨虫、昆虫（果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽）、蝌蚪、水蛭、蓝蟹（微感毛）、变形虫、水丝蚓
2、植物样品
1）营养器官
茎：边材、心材、微管形成层、木质部
2）生殖器官
花：花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子：整体、胚
果实：果壳、果皮、果肉（苹果、柑橘）、籽粒、棉花纤维、棉桃
3）细胞：植物悬浮细胞、液泡
4）愈伤组织
3、微生物样品
酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌（大肠杆菌）
4、其它生物样品
周丛生物
5、非生物样品
金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料
六、样品需要做哪些前处理
国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测，因此动植物材料在检测前，不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。
1、动物单细胞
因NMT是活体检测，故从培养箱中拿出来后，置于培养皿中，直接检测即可。
2、动物组织
因NMT是活体检测，无需提前处理。如检测部位天然暴露在外，如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞，直接检测即可。如检测部位位于体内，需在检测时暴露出检测部位（可采用麻醉的方式），后检测即可。
3、植物根茎叶等组织器官
天然暴露在外的组织器官，例如根、茎、叶的表面，无需任何处理，直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。
4、植物原生质体/液泡
因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测，检测时不接触样品，故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中，提取出来后检测。
5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
无需提前处理。因这些细胞处于组织内部，故检测时采用撕取等方式，暴露出相应细胞即可。
6、植物花粉管
离体萌发：在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测；在体萌发：将柱头置于培养皿中，待萌发一段时间后即可直接检测。
7、植物果实
无需提前处理。如待测部位位于果实内部，需在检测前暴露出相应部位即可。
8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时，置于培养皿中检测即可。
七、有哪些检测方式？
即瞬时处理，是指在检测过程中，在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的处理方法，目的是为了观察瞬间干旱胁迫下，样品短时间内的离子/分子的变化趋势，即短时效应。
2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后（数十分钟/数小时/数天），观察植物离子/分子进出的情况，即长时效应。
八、检测环境是空气还是溶液
检测时，只要求待测部位浸于溶液中（无需整体都浸在溶液里）。
九、样品是如何检测的
十、可以送样检测吗
可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理，由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心，提供检测服务。点击获取测试服务
