NMT测试液标准
各指标测试液总要求
检测指标 | 测试液要求 |
Cl- | 不能添加NO3- |
Na+ | 添加K+浓度时需低于Na+浓度10倍 |
Cu2+ | 不能添加Cl- |
Pb2+ | 不能添加Cl- |
NH4+ | 不能添加K+ |
Mg2+ | 建议不添加Cd2+和Ca2+,如需添加则需要低于Mg2+浓度10 |
Cd2+ | 添加Ca2+浓度不能高于Cd2+ |
植物根系
适用于植物根系等直接接触培养环境的组织
检测指标 | 测试液成分 |
H+ | xx mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0 |
K+ | xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Na+ | xx mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Ca2+ | xx mM CaCl2,pH6.0 |
Cl- | xx mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NH4+ | xx mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NO3- | 0.1mM CaCl2,xx mM NaNO3,pH6.0 |
Cd2+ | xx mM CdCl2,xxmM CaCl2,pH6.0 |
Pb2+ | xx mM Pb(NO3)2,pH6.0 |
Cu2+ | xx mM Cu(NO3)2(也可使用CuSO4),pH6.0 |
Mg2+ | xx mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
H2O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
IAA | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
校正液及备注 | |
(1)pH:植物组织测试液pH为6.0,特殊样品以培养环境的pH为准。(如在pH7环境下培养/处理的样品,可将pH设置为7) (2)待测离子浓度与培养/处理环境中该离子浓度一致(如检测Cd2+,培养环境为0.5 mM CdCl2,测试液可用0.5 mM CdCl2,pH6.0)检测指标为分子时直接使用左侧列表中对应的溶液。 (3)校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。(如K+测试液为0.5 mM KCl,pH6.0,校正液为1mM KCl,pH6.0/0.1mM KCl,pH6.0) |
叶肉细胞,保卫细胞,茎等
不直接接触培养环境的样品(如叶肉细胞,保卫细胞,茎等)
检测指标 | 测试液成分 |
H+ | 0.1mM CaCl2,0.3mM MES ,pH6.0 |
K+ | 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Na+ | 0.5mM NaCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Ca2+ | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Cl- | 0.1mM KCl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NH4+ | 0.1mM NH4Cl,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
NO3- | 0.1mM CaCl2,0.1mM NaNO3,pH6.0 |
Cd2+ | 0.1mM CdCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
Pb2+ | 0.1mM Pb(NO3)2,pH6.0 |
Cu2+ | 0.1mM Cu(NO3)2,pH6.0 |
Mg2+ | 0.1mM MgCl2,0.1mM CaCl2,pH6.0 |
O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
H2O2 | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
IAA | 0.1mM CaCl2,pH6.0 |
校正液及备注 | |
校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。(如K+测试液为0.1 mM KCl,pH6.0,校正液为0.5mM KCl,pH6.0/0.05mM KCl,pH6.0) |
动物细胞
检测指标:H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、NH4+、NO3-、Cd2+、 Pb2+、 Cu2+、 Mg2+、O2、H2O2
测试液成分:
测试液1:1.8 mM CaCl2,5.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,0.8 mM MgSO4,pH 6.8
测试液2:0.4 mM Ca(NO3)2,0.5 mM MgSO4,5.0 mM KCl,20 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8
测试液3:1.0 mM CaCl2,2.0 mM MgCl2,3.0 mM KCl,25 mM NaHCO3,100 mM NaCl,pH 6.8
校正液及备注:
(1)MEM、DMEM、IMDM、GMEM等相似培养基培养的细胞使用测试液1。
(2)RPMI-1640等相似培养基培养的细胞使用测试液2。
(3)Ham's F12等相似培养基培养的细胞使用测试液3。
(4)检测NH4+、Cd2+、Pb2+、Cu2+时,在对应测试液1,测试液2,测试液3成份基础上,加上待测离子成份即可。
(5)检测Pb2+、Cu2+时,需要将Cl-更换为NO3-或者SO42-。
(6)校正液:根据测试液中待测指标浓度,设置高于和低于测试液浓度的校正液,且高低校正液浓度一般相差10倍。
花粉管
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
测试液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 1.6 mM H3BO3, 0.3 mM MES, 5% sucrose, pH 5.8
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
种子
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
测试也成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.2 mM Na2SO4, 0.3 mM MES, pH 6.0
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
液泡、原生质体
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、O2、H2O2、IAA
测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 1.0 mM NaCl, 600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
检测指标:Cd2+
测试液成分: ** mM Cd2+(根据实验Cd2+处理浓度定), 0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl,600 mM mannitol, 0.05mM MES, pH 6.0
酵母细胞
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-
测试液成分:0.1 mM CaCl2, 0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.3 mM MES, 10 mM glucose, pH 6.0
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
检测指标:IAA、O2、H2O2
测试液成分: 酵母培养基稀释100倍
硅藻(淡水)
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA
测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
硅藻(淡水,BG11培养基)
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、H2O2、IAA
测试液成分:0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 15 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, 0.1% sucrose, pH 7.8
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
绿藻(淡水)
检测指标:Ca2+、H+、K+、Na+、Cl-、Mg2+、O2、IAA
测试液成分:0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.1 mM MgCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 7.1
注:检测Cl-时,需要去除测试液中的NO3-
绿藻(海水)
检测指标:H2O2、Ca2+、IAA
测试液成分:360mM NaCl, 2.0mM NaHCO3, 8.0mM KCl, 0.1mM Na2SO4, 0.1mM CaCl2, pH8.1
大肠杆菌
检测指标:H+、K+、Na+
测试液成分:0.1 mM KCl, 1.0 mM NaCl, 0.1 mM HEPES, 1.0 mM glucose, pH 7.0
愈伤组织
检测指标:H+、K+、Na+
测试液成分:1.0 mM NaCl, 0.1 mM KCl, 0.2 mM CaCl2, pH 6.0